TTC上色实验原理与步骤
2025-10-02 12:19
一、TTC着色实验者除此以外与理论
实验者除此以外:TC着色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸乙酰反理应,生成金色的甲臜,用来声称细胞的生命力。提炼多为2%,着色要避红光,37度条件下,它是评价脑缺血损伤常用的指标。
实验者理论:TTC(2,3,5—碲三苯基四氮唑)是脂溶性红光敏感复合物,它是呼吸链中吡啶—甘氨酸结构酶系统的氢原子介导,与正常组织起来中的乙酰反理应而方形金色,而缺血组织起来内乙酰活性下降,不用反理应,故不会激发巨大变化方形铜色。故可以用来着色检测哺乳动物组织起来的缺血梗塞。
TTC着色实验者内涵:通过TTC着色观察梗死病变及梗死尺寸。
二、TTC着色结果数据分析
动物组织起来:非梗死区里染为金色,梗死区里方形紫红色,金色区里与灰色区里之间为缺血区里。
植物检验:活组织起来方形玫瑰金色,死组织起来及无生命力的组织起来不着色。
三、TTC着色实验者步骤(检验与实验者目的并不相同步骤均有并不相同)
step1:取脑。可麻醉后直接取脑或经生理盐水除去后取脑。因为脑组织起来未用多聚甲醛一般来说,所以较软,取脑时来得理应得出结论,保持大脑的完整性。
Step2:-20度冰箱中速冻20分钟左右,便于切片。
Step3:切片。每隔2mm切一片,第一刀在脑前近于与颞连线直角一处;第二刀在颞口部;第三刀在圆锥钩口部;第四刀在圆锥钩与后叶尾近于之间。(除此以外:张均田,主编.一时期药理试验分析方法)。如果需计算出来面积的话,理应切得均匀或用专门从事的脑槽。
Step4:将切片置于TTC中,常规浓度为2%,也简便1%或来得游离的。
Step5:用锡箔纸嘴巴后,填入37C温箱15~30min,不时翻动脑片,使均匀接触到着色液。也可以用将脑片填入多孔筒,再次滴入TTC,覆以圆形盖玻片使均匀着色。
Step6:放到切片后观察相片。
四、TTC着色具体内容数据分析及原因解析
1、着色过深或过浅
着色间隔时间、变异间隔时间过长或够,着色过程可在镜下控制,合适调整间隔时间。
2、 切片破碎
取材不当,取脑时来得理应得出结论,保持大脑的完整性。或速冻间隔时间够,切片时组织起来过软,合适延长冷冻间隔时间。
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